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NucleoCounter是ChemoMetec A/S開發(fā)的具有新技術(shù)的產(chǎn)品，它解決傳統(tǒng)細(xì)胞計(jì)數(shù)的問題。它適合研究和生產(chǎn)應(yīng)用(T-瓶、生物反應(yīng)器、微載體等)中對(duì)培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。NucleoCounter核心是內(nèi)置的熒光顯微鏡設(shè)計(jì)，包括LED激發(fā)光源，光學(xué)元件(棱鏡、激發(fā)和發(fā)射光濾片)和CCD，檢測(cè)單個(gè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞信號(hào)。NucleoCounter分析結(jié)果是直接的細(xì)胞濃度，比間接方法結(jié)果更準(zhǔn)確。
　·操作簡(jiǎn)單
　·分析快速(30秒分析時(shí)間)
　·無(wú)需校正
　·不需要清洗
　·無(wú)需維護(hù)保養(yǎng)
　·體積小，方便便捷
　　NucleoCounter可用于研究和生產(chǎn)，其使用簡(jiǎn)單，的分析速度和精度，使它也同樣適用于的研究應(yīng)用和日常測(cè)量。
 

◆原理：
　　ChemoMetec A/S的NucleoCounter是內(nèi)置的熒光顯微鏡設(shè)計(jì)，檢測(cè)與細(xì)胞核酸結(jié)合的熒光染料PI的信號(hào)。NucleoCounter分析的結(jié)果是總細(xì)胞濃度或死細(xì)胞濃度，取決于樣品的處理。

◇碘化丙啶
     碘化丙啶(PI)是一種熒光分子和高選擇性DNA染料，PI可與雙鏈DNA(dsDNA)高效結(jié)合，一旦與DNA結(jié)合，激發(fā)和發(fā)射光波長(zhǎng)轉(zhuǎn)換，與游離的 PI(沒有結(jié)合DNA)相比，熒光強(qiáng)度提高20-30倍(提高了信噪比)，從而顯著提高測(cè)量精度。不同細(xì)胞(不同的細(xì)胞大小或細(xì)胞形態(tài))的細(xì)胞核大小基本上是一致的，因而不需要校正。

◇碘化丙啶排斥法(PIE)
    具有完整細(xì)胞膜的活細(xì)胞DNA實(shí)際上是不會(huì)被PI染上色，因而，活細(xì)胞在分析前需要破壞細(xì)胞膜；另一方面，死細(xì)胞的細(xì)胞膜可透過PI，因而死細(xì)胞不需要裂解就可以染上色。

◆PI排斥法測(cè)定細(xì)胞活力
    對(duì)懸浮細(xì)胞用碘化丙啶排斥法(PIE)和結(jié)合總細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，可以算出死細(xì)胞和活細(xì)胞的比例。PIE方法分析細(xì)胞活力原理是基于分析的細(xì)胞膜對(duì)PI的滲透特性。
 

◆應(yīng)用：
　　NucleoCounter能分析哺乳動(dòng)物細(xì)胞的總數(shù)(濃度)、死細(xì)胞總數(shù)(濃度)、活細(xì)胞數(shù)(濃度)和細(xì)胞活力,因而，其能用于普通實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng),微載體培養(yǎng)和生物反應(yīng)器培養(yǎng)等方面的細(xì)胞計(jì)數(shù)和測(cè)定細(xì)胞活力。

◇操作非常簡(jiǎn)單
　·樣品處理
　　將細(xì)胞樣品與等體積的試劑 A-100(裂解/分散緩沖液)和試劑B(穩(wěn)定緩沖液)
　·上樣
　　將分析板的頭部浸入裂解好的液體中，按下活塞，將溶液吸入分析板中
　·分析
　　將分析板放入設(shè)備中，按下“Run”鍵。30秒后，細(xì)胞計(jì)數(shù)會(huì)在設(shè)備的屏幕上顯示。數(shù)據(jù)也可通過USB接口傳送到外部電腦中或在外部打印機(jī)上打印

 NucleoCassette　板
　·PI固定在一次性NucleoCassette板的內(nèi)部，當(dāng)細(xì)胞裂解液進(jìn)入到Cassette板內(nèi)，PI溶解，細(xì)胞DNA被染上色
　·Cassette放入NucleoCounter后，染色混合物自動(dòng)轉(zhuǎn)到NucleoCassette分析室中。綠色光激發(fā)PI-DNA產(chǎn)生紅色光，CCD相機(jī)檢測(cè)發(fā)出的紅光，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)
　·樣品分析后，PI留在NuleoCassette內(nèi)，可安全地丟棄，這樣提供了安全的樣品處理
　·每塊NucleoCassette分析室厚度都經(jīng)過嚴(yán)格檢測(cè)，可精確決定每個(gè)測(cè)量的分析體積，這個(gè)特性加上耐用的光學(xué)元件，使NucleoCounter無(wú)需校正
　·由于NucleoCassette包含整個(gè)流路系統(tǒng)和測(cè)量室，因而NucleoCounter不需要清潔和維護(hù)